Missi Pyle asistió a la North Carolina School of the Arts y se graduó en 1995. Desde entonces, Pyle ha tenido una carrera significativa en muchas películas y series de televisión. También ha establecido en paralelo una carrera como cantante como miembro de la banda de country-rock Smith & Pyle con la actriz Shawnee Smith.

Pyle comenzó una carrera como actriz interpretando un papel menor en la película de comedia As Good as It Gets (1997) protagonizada por Jack Nicholson y Helen Hunt. Sus siguientes papeles notables fueron en la parodia de ciencia ficción Galaxy Quest (1999), Home Alone 4: Taking Back the House (2002) donde interpretó su primer papel como villana, las películas de Tim Burton Big Fish (2003) y Charlie and the Chocolate Factory (2005) protagonizadas por Johnny Depp y Christopher Lee, Just My Luck (2006) protagonizada por Lindsay Lohan, y Soccer Mom (2008) donde tuvo un doble papel. Pyle también ha interpretado papeles como invitada en muchas series de televisión como Mad About You (1992) también protagonizada por Helen Hunt, Frasier (1993), The One with Ross' Teeth (1999), Ally McBeal (1997), tres episodios de Two and a Half Men (2003), tres episodios de Boston Legal (2004), Grey's Anatomy (2005), dos episodios de Heroes (2006), y dos episodios de The Mentalist (2008). Pyle también es actriz de voz ocasional, y ha dado voz a personajes en un episodio de la serie Family Guy (1999) y dos episodios de American Dad! (2005).

Pyle comenzó una carrera como cantante cuando conoció a Shawnee Smith en 2007 mientras filmaba un piloto de comedia de ABC. Pyle declaró que su sueño era estar en una banda de rock, y Smith le dio la oportunidad creando la banda de country-rock Smith & Pyle en Los Ángeles, California. Su álbum debut "It's OK to Be Happy" (2008) fue grabado en Joshua Tree, California y fue lanzado bajo su propio sello discográfico cuando se convirtieron en socias comerciales. Su primera actuación en vivo fue en Texas el 18 de enero de 2008 y desde entonces, la banda actuó en muchos otros estados, especialmente en West Virginia, hasta el 29 de mayo de 2010 en California. En 2011, las actrices se disolvieron oficialmente antes de que se completara su segundo álbum.